RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的檢測(cè),保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過(guò)程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問(wèn)題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對(duì)極個(gè)別客戶溶解問(wèn)題和轉(zhuǎn)染效率問(wèn)題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽(yáng)離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見(jiàn)細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染測(cè)試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過(guò)95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對(duì)復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國(guó)產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:
1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。
2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請(qǐng)勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請(qǐng)用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。
4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。
歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開(kāi)發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠(chéng)實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營(yíng)要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無(wú)線標(biāo)簽機(jī)。
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宿遷光伏組件封裝設(shè)備維保
光伏組件封裝設(shè)備的安全標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范對(duì)設(shè)備生命周期的不同階段進(jìn)行了規(guī)范。根據(jù)搜索結(jié)果,以下是一些相關(guān)的規(guī)范和階段:設(shè)計(jì)階段:在光伏組件封裝設(shè)備的設(shè)計(jì)階段,安全標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范要求制造商考慮設(shè)備的安全性能和可靠性 。
極速禮品網(wǎng)是一家由倉(cāng)庫(kù)直接向外發(fā)貨的平臺(tái),該平臺(tái)在全國(guó)擁有多家自己的倉(cāng)庫(kù),并且支持圓通、韻達(dá)、申通、中通、百世、郵政等五家快遞物流,并每一個(gè)倉(cāng)庫(kù)的禮品都不一樣,商家可以根據(jù)自己的需求選擇對(duì)應(yīng)的倉(cāng)庫(kù)所在 。
PCB和FPC有什么樣的區(qū)別?PCBPrintedCircuitBoard),中文名稱為印制線路板,簡(jiǎn)稱印制板,是電子工業(yè)的重要部件之一。幾乎每種電子設(shè)備,小到電子手表、計(jì)算器,大到計(jì)算機(jī),通訊電子設(shè) 。
燈光設(shè)計(jì)是室內(nèi)裝飾中不可或缺的一部分,它可以為房間增添氛圍,營(yíng)造出不同的情感體驗(yàn)。選擇合適的燈光設(shè)計(jì)可以讓房間更加溫馨舒適,讓人們?cè)谄渲懈械绞孢m和放松。在選擇燈光設(shè)計(jì)時(shí),需要考慮房間的大小、顏色和風(fēng)格 。
住人集裝箱瑞安雙層集裝箱房鑫盛6元集裝箱活動(dòng)房材質(zhì)彩鋼板產(chǎn)地/品牌溫州鑫盛活動(dòng)房主營(yíng)產(chǎn)品:活動(dòng)房彩鋼房活動(dòng)房搭建回收二手活動(dòng)房鋼結(jié)構(gòu)活動(dòng)房溫州經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)海城鑫盛活動(dòng)板房加工廠所在地:浙江溫州在線詢 。
現(xiàn)在的智能家居消費(fèi)者,常常會(huì)遇到新購(gòu)買的家庭智能設(shè)備無(wú)法接入原有系統(tǒng)的尷尬場(chǎng)面。市面上智能家居品牌各自壁壘的情況可以說(shuō)是十分普遍,因此無(wú)法做到真正的全屋智能、萬(wàn)物互聯(lián),升級(jí)成本及購(gòu)入成本對(duì)于消費(fèi)者來(lái)說(shuō) 。
推拉門的特性不論是平方米的衛(wèi)生間,還是不規(guī)則的儲(chǔ)物間,只要換上推拉門,再狹小的空間都不會(huì)被浪費(fèi),折疊式的推拉門甚至還能100%開(kāi)啟,不占一分空間。從使用上看,推拉門無(wú)疑極大地方便了居室的空間分割和利用 。
這款紅光儀器是實(shí)用性和效率兼具的設(shè)備,適合專業(yè)的美容師和家庭使用者。紅光設(shè)備可以讓你獲得更加健康光滑的肌膚,改善皮膚問(wèn)題,尤其是難以改善的痘痘問(wèn)題。采用這一光療技術(shù)可以去除眼袋和黑眼圈,讓肌膚更加明亮 。
作業(yè)場(chǎng)所職業(yè)病危害因素檢測(cè)、評(píng)價(jià)是職業(yè)衛(wèi)生管理的重點(diǎn),用人單位應(yīng)根據(jù)工作規(guī)范定期進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、評(píng)價(jià),并級(jí)時(shí)公布檢測(cè)結(jié)果,職業(yè)病危害因素檢測(cè)-方面可以評(píng)價(jià)作業(yè)場(chǎng)所是否符合職業(yè)衛(wèi)生相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的要求,另- 。
在水域活動(dòng)中,溺水事故往往發(fā)生得迅速且無(wú)法預(yù)料。為了保護(hù)人們的生命安全,精位智能防溺水系統(tǒng)應(yīng)運(yùn)而生。該系統(tǒng)利用先進(jìn)的傳感器技術(shù)和智能算法,提供了一套而高效的防溺水解決方案。據(jù)了解,精位智能防溺水系統(tǒng)是 。
推拉門的特性不論是平方米的衛(wèi)生間,還是不規(guī)則的儲(chǔ)物間,只要換上推拉門,再狹小的空間都不會(huì)被浪費(fèi),折疊式的推拉門甚至還能100%開(kāi)啟,不占一分空間。從使用上看,推拉門無(wú)疑極大地方便了居室的空間分割和利用 。